日前上午，我公司錢(qián)經(jīng)理收到浙江大學(xué)鄭老師發(fā)來(lái)的qq會(huì)話(huà) 。鄭老師表示：ELISA試劑盒的檢測(cè)結(jié)果不理想，不知道是哪里出了問(wèn)題。幫我看下是什么原因，我自己合成8個(gè)氨基酸的抗原短肽，和BSA耦連后免疫動(dòng)物，1個(gè)月后用ELISA測(cè)定血清中針對(duì)抗原短肽的抗體滴度，具體步驟：用碳酸緩沖液溶解抗原短肽后包板，4度冰箱18小時(shí)， 再用1%OVA37度封閉2小時(shí)，洗板3次。待測(cè)血清用10%小牛血清倍比稀 釋?zhuān)?7度溫育1小時(shí)，洗板3次，加入二抗，37度溫育40分鐘，洗板3次 ，加TMB顯色，結(jié)果比較詭異，陰性對(duì)照也顯色了，且OD值和陽(yáng)性差別不大。是什么原因呢？是洗板的問(wèn)題嗎？

    錢(qián)經(jīng)理將問(wèn)題轉(zhuǎn)至技術(shù)部，上海恒遠(yuǎn)生物公司專(zhuān)業(yè)技術(shù)員回應(yīng)， ELISA結(jié)果不理想原因可以根據(jù)這幾個(gè)方面分析：
    1.洗板是否串孔，如串孔的話(huà)可能造成污染；你一抗、二抗 每次洗板時(shí)洗5遍以上。
    2.封閉液的問(wèn)題，你說(shuō)陰性對(duì)照也顯色了，那主要的問(wèn)題應(yīng)該是封閉，應(yīng)重新考慮用OVA封閉是否適合，如果OVA封閉效果不好的話(huà) 可以選擇其他的封閉液。封閉液的選擇園子里有很多相關(guān)的帖，你搜一下看看。
    3.建議ELISA試劑盒包被在37度兩小時(shí)，這樣的效果可能會(huì)好 一些。

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